AAT Bioquest 15264  Amplite® 熒光 NADP/NADPH 比率檢測試劑盒 *紅色熒光*

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AAT Bioquest 熒光比率檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 15264 Amplite® 熒光 NADP/NADPH 比率檢測試劑盒 *紅色熒光*  250 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：15264

產(chǎn)品名稱：Amplite® 熒光 NADP/NADPH 比率檢測試劑盒 *紅色熒光*

產(chǎn)品規(guī)格：250 Tests

AAT Bioquest 熒光比率檢測試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest 15264 Amplite® 熒光 NADP/NADPH 比率檢測試劑盒 *紅色熒光*  250 Tests，產(chǎn)品說明：

煙xian胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）和煙xian胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）是細胞中發(fā)現(xiàn)的兩種重要的輔助因子。NADH是NAD +的還原形式，NAD +是NADH的氧化形式。它通過酯鍵將磷酸基團添加到腺苷核苷酸的 2' 位置以形成 NADP。NADP用于合成代謝生物反應(yīng)，如脂肪酸和核酸合成，需要NADPH作為還原劑。傳統(tǒng)的NAD / NADH和NADP / NADPH測定是通過監(jiān)測340nm處的NADH或NADPH吸收來完成的。該方法靈敏度低，干擾高，因為測定是在需要昂貴的石英微孔板的紫外范圍內(nèi)進行的。我們的 Amplite® NADP/NADPH 比率檢測試劑盒為靈敏檢測 NADP、NADPH 及其比率提供了一種方便的方法。系統(tǒng)中的酶特異性識別酶循環(huán)反應(yīng)中的NAD/NADH。無需從樣品混合物中純化NADP/NADPH。酶循環(huán)反應(yīng)顯著提高了檢測靈敏度。此外，該測定具有非常低的背景，因為它在紅色可見光范圍內(nèi)運行，從而顯著減少了生物樣品的干擾。該測定已顯示出高靈敏度和低干擾。該Amplite®熒光NADP/NADPH檢測試劑盒可以采用方便的96孔或384孔微量滴定板形式進行，無需分離步驟即可輕松適應(yīng)自動化。

平臺

吸光度酶標儀

吸光度 576 ± 5 納米

推薦板 清除底部

熒光酶標儀

Excitation：540 納米

Emission：590 納米

Cutoff：570 納米

推薦板：純黑色

組件

組分A：NADP / NADPH回收酶混合物    2瓶（凍干粉）

組件 B：NADPH 傳感器緩沖器    1 瓶 （20 mL）

組件C：NADPH標準 1 瓶 （167 μg）

組分D：NADPH提取溶液 1 瓶 （10 mL）

組分E：NADP提取溶液   1 瓶 （10 mL）

組件 F：NADP/NADPH 控制解決方案     1 瓶 （10 mL）

組分G：NADP/NADPH裂解緩沖液   1 瓶 （10 mL）

1.     制備 25 μL NADPH 標準品和/或測試樣品

2.     加入 25 μL NADPH 或 NADP 提取溶液

3.     37歲孵化oC 15 分鐘

4.     加入 25 μL NADP 或 NADPH 提取溶液

5.     加入 75 μL NADP/NADPH 工作溶液

6.     在37°C孵育15分鐘-2小時

7.     監(jiān)測Ex/Em = 540/590 nm時的熒光強度（截止= 570 nm）

重要說明：

強烈建議用裂解緩沖液（組分G）在37oC并使用上清液進行實驗。

在開始實驗之前，在室溫下解凍每種試劑盒組分之一。

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)

NADPH 標準溶液 （1 mM）

將 200 μL PBS 緩沖液加入 NADPH 標準品（組分 C）小瓶中，制成 1 mM （1 nmol/μL） NADPH 標準溶液。

標準溶液的制備

NADPH 標準

將10 μL 1 mM NADPH 標準溶液加入 990 μL PBS緩沖液（pH 7.4）中，生成10 μM （10 pmols/μL）NADPH標準溶液（NS7）。取10μM NADPH標準溶液，在PBS中進行1：3系列稀釋，以獲得NADPH標準品（NS6 - NS1）的連續(xù)稀釋液。注意：稀釋的NADPH標準溶液不穩(wěn)定，應(yīng)在4小時內(nèi)使用。

工作溶液的制備

將 10 mL NADPH 傳感器緩沖液（組分B）加入NADP/NADPH回收酶混合物（組分A）瓶中，充分混合制成 NADP/NADPH工作溶液。

注意 該 NADP/NADPH 工作溶液足以在125孔板中進行96次測定。

產(chǎn)品訂購信息：

15264 Amplite® 熒光 NADP/NADPH 比率檢測試劑盒 *紅色熒光*  250 Tests